產品詳情
簡單介紹：
4-香豆酸:輔酶A連接酶(4CL)測試盒由上海通蔚科研生物公司提供，通蔚商鋪產品包括4-香豆酸:輔酶A連接酶(4CL)活性試劑盒價格; 規(guī)格; 包裝; 說明書; 測定方法等生化試劑盒的詳細介紹，歡迎新老客戶前來選購。
詳情介紹：
4-香豆酸:輔酶A連接酶(4CL)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 ?意: 正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
4CL 是連接苯丙酸途徑與木質素特異合成途徑的關鍵酶,主要催化肉桂酸生成相應的肉桂酸輔酶 A 酯,是合成木質素與其他苯丙烷類化合物的代謝流向調控點。該酶主要存在于高等植物、酵母和菌類中,研究該酶可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質素沉積的代謝機理,為減少水果石細胞含量而提高其品質提供依據(jù)。
測定原理:
4CL 催化 4-香豆酸和 CoA 生成 4-香豆酸 CoA,在 333nm 下測 4-香豆酸 CoA 生成速率,即可反映 4CL 活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取:
培養(yǎng)細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。